领会气相色谱-质谱手艺检测尿无机酸程度诊断的遗传代谢病患儿的氨基酸、无机酸、脂肪酸氧化代谢病疾病谱。

1. GC-MS尿无机酸谱检测：检测方式拜见文献，标本采集选用新颖尿液或尿滤纸片，尿样本用尿素酶、盐酸羟胺、氢氧化钠及盐酸处置后除去尿素和卵白质，插手17烷酸做为内标，用乙酰乙酯二次萃取，萃取后氮气吹干，正在吹干的管子里插手衍生化试剂双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺取三甲基氯硅烷夹杂物衍生化后的样本上机行GS-MS（日本岛津公司QP2010）检测。

GC-MS尿无机酸谱检测手艺是通过检测物质的质荷比对物质进行定性和定量检测，次要是通过检测尿液中数十种无机酸程度的凹凸，判断能否为IMD。尿无机酸谱检测手艺被认为是筛查IMD、确定诊断无效的方式之一。国内虽接踵报道了一系列相关使用尿无机酸谱检测手艺对IMD疑似患儿筛查和诊断方面的研究，但多集中于对某一地域IMD发病的筛查，且病例收集时间短，IMD疑似病例总数少，疾病品种少，研究成果存正在必然的选择局限和偏倚。本研究操纵GC-MS诊断IMD 2 461例，显示32种氨基酸、无机酸及脂肪酸氧化代谢病，诊断率为5.4%，了此项手艺正在IMD患儿中的疾病谱。因为本研究对象并未笼盖全国各地域患儿，缺乏严酷的纳入及解除尺度，并不克不及完全代表我国IMD正在儿童中的分布环境，仍需扩大研究区域及样本量，进一步研究。

45 901例临床IMD疑似患儿进行GC-MS尿无机酸检测和（或）血氨基酸及酰基肉碱质谱检测，确诊2 461例，诊断率为5.4%，此中男1 446例，女1 015例。共有32种遗传代谢病，此中氨基酸代谢病10种662例（26.9%），常见的前6种疾病累积占94.7%（627/662）。无机酸血症17种1 683例（68.4%），常见的前6种疾病累积占95.2%（1 603/1 683）。脂肪酸β氧化代谢病5种116例（4.7%），常见的前2种疾病累积占81.9%（95/116）。脂肪酸氧化代谢病较氨基酸代谢病及无机酸血症少见。

气相色谱-质谱手艺尿无机酸谱检测诊断的疾病中无机酸血症最常见，然后为氨基酸代谢病及脂肪酸氧化代谢病。

利用SPSS 24.0进行所有统计阐发，描述分歧疾病的发生例数和疾病的形成比，分类变量以例（%）暗示。

部门IMD患儿体内发生较多无机酸，由尿液排出，导致尿无机酸程度显著增高，部门IMD表示为统一种氨基酸或酰基肉碱非常，仅根据血液氨基酸及酰基肉碱谱程度非常不克不及诊断，可通过尿无机酸程度非常诊断。如甲基丙二酸血症取丙酸血症血中丙酰肉碱均增高，纯真依托丙酰肉碱程度增高难以辨别，通过尿无机酸检测，甲基丙二酸及甲基枸橼酸增高提醒甲基丙二酸血症，甲基枸橼酸及3-羟基丙酸增高提醒丙酸血症，可对二者进行辨别和诊断。3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症、多种辅酶A羧化酶缺乏症、3-羟-3-甲基戊二酸尿症及β-酮硫解酶缺乏症患儿血酰基肉碱检测均表示为3-羟基-异戊酰肉碱增高，但这4种疾病表示为分歧的尿无机酸增高，可通过尿无机酸程度非常进行辨别和诊断。分歧类型酪氨酸血症均有血酪氨酸程度增高，单从血氨基酸程度难以辨别疾病类型，通过尿琥珀酸丙酮增高可诊断酪氨酸血症Ⅰ型。

回首性研究。以上海交通大学医学院从属新华病院2005年1月至2021年12月诊断IMD的2 461例患儿为研究对象。所有患儿家长均知情同意。本研究经上海交通大学医学院从属新华病院伦理委员会核准（XHEC-D-2022-057）。

无机酸血症患儿疾病谱见表2，甲基丙二酸血症最常见，共1 129例，拥有机酸血症患儿的67.1%，占确诊患儿的45.9%，然后顺次为丙酸血症、戊二酸血症-Ⅰ型、异戊酸血症、3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症及多种羧化酶缺乏症，其他无机酸血症较少见。

虽倡导精准医疗，但质谱检测手艺正在IMD诊治中的地位仍无可替代。本研究通过GC-MS尿无机酸谱检测手艺诊断的较常见的10种疾病别离为甲基丙二酸血症、高苯丙氨酸血症、丙酸血症、戊二酸血症-Ⅰ型、希特林卵白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、异戊酸血症和3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症。本研究IMD疾病谱取其他地域报道有所差别，可能取各地域遗传病患病率分歧相关，但甲基丙二酸血症仍为最常见的IMD，这取既往报道不异。本研究发觉部门IMD仅根据尿无机酸检测可诊断，包罗3种氨基酸代谢病（高苯丙氨酸血症、枫糖尿病及酪氨酸血症-Ⅰ型）和17种无机酸血症。而有些则需尿无机酸程度连系血氨基酸或酰基肉碱谱程度才可诊断，包罗3种氨基酸代谢病（希特林卵白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症及精氨酸血症）和5种脂肪酸氧化代谢病（多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、肉碱转运妨碍及中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症）。

干血滤纸片经含酰基肉碱和氨基酸内标的甲醇萃取，操纵质谱进行检测。盐酸正丁醇衍生后，2. 质谱血氨基酸及酰基肉碱程度检测：质谱检测干血滤纸片中酰基肉碱和氨基酸的方式参考文献，

遗传代谢病（inherited metabolic disease，IMD）又称为先本性代谢缺陷，是因为生化代谢路子中的酶、辅酶或运载卵白缺陷或非常，导致底物堆积或产品缺乏，从而惹起响应临床症状的一系列疾病。1966年Tanaka等初次利用气相色谱-质谱（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）尿无机酸谱检测诊断异戊酸血症，推进了IMD的诊治。部门IMD包罗氨基酸、无机酸及脂肪酸氧化代谢病根据尿无机酸检测成果获得诊断。本研究对上海交通大学医学院从属新华病院儿内排泄遗传代谢科2005至2021年通过GC-MS尿无机酸谱检测确诊的2 461例IMD患儿疾病谱进行阐发，旨正在领会GS-MS尿无机酸谱检测手艺检测的IMD患儿疾病谱。

3. IMD诊断根据：（1）重生儿筛查阳性者可无临床表示；（2）疾病的尿无机酸程度增高；（3）疾病的血氨基酸或酰基肉碱程度非常；（4）部门患儿连系基因检测成果诊断。

2 461例患儿中男1 446例，女1 051例，共有32种遗传代谢病，此中氨基酸代谢病10种662例（26.9%），常见的前6种疾病为高苯丙氨酸血症、希特林卵白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、尿黑酸尿症及酪氨酸血症-Ⅰ型；无机酸血症17种1 683例（68.4%），常见的前6种疾病为甲基丙二酸血症、丙酸血症、戊二酸血症-Ⅰ型、异戊酸血症、3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症及多种羧化酶缺乏症；脂肪酸β氧化代谢病5种116例（4.7%），常见的前2种疾病为多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症和短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症。

氨基酸代谢病患儿疾病谱见表1，高苯丙氨酸血症最常见，共295例，占氨基酸代谢病患儿的44.6%，占确诊患儿的12.0%，然后顺次为希特林卵白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、尿黑酸尿症及酪氨酸血症-Ⅰ型，其他疾病较少见。

回首性阐发2005年1月至2021年12月上海交通大学医学院从属新华病院诊断为遗传代谢病的2 461例患儿的疾病谱，患儿均通过气相色谱-质谱尿无机酸谱检测，并连系血质谱氨基酸及酰基肉碱检测成果及基因变异检测成果诊断。

部门IMD表示为血氨基酸或酰基肉碱程度一般，可通过尿无机酸检测诊断。如丙二酸结合甲基丙二酸尿症患儿血酰基肉碱程度一般，但尿液无机酸中丙二酸、甲基丙二酸及甲基枸橼酸程度增高，故诊断。尿黑酸尿症、甘油酸激酶缺乏症、甲羟戊酸尿症、延胡索酸尿症、海绵状脑白量变性等遗传性代谢病仅表示为尿无机酸程度非常，通过检测尿液中尿黑酸、甘油酸、甲羟戊酸内酯、延胡索酸、N-乙酰天冬氨酸等无机酸程度做出诊断。

综上所述，GC-MS尿无机酸谱检测提醒的IMD以甲基丙二酸血症、高苯丙氨酸血症、丙酸血症、戊二酸血症-Ⅰ型、希特林卵白缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、枫糖尿病、多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、异戊酸血症和3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症多见。临床诊疗过程中，如表示为频频、抽搐、嗜睡、无体格正常的发育掉队、智力掉队、肌张力非常、肝脾肿大等，尝试室查抄提醒频频低血糖、酸中毒、高血氨、高乳酸血症、肝功能非常、电解质紊乱及肌酸激酶增高档患儿需要考虑IMD。鉴于大部门IMD无的临床表示，且部门IMD同时存正在尿无机酸及血氨基酸或酰基肉碱非常，故对于临床IMD疑似患儿需要同时送检尿GC-MS无机酸检测及血质谱氨基酸及酰基肉碱检测。

脂肪酸氧化代谢病患儿疾病谱见表3，多种酰基辅酶A脱氢酶缺乏症最常见，共52例，占脂肪酸氧化代谢病患儿的44.8%，占确诊患儿的2.1%，然后顺次为短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、肉碱转运妨碍及中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症。