重生儿遗传病筛查病种的选择次要参考1968年世界卫生组织Wilson-Jungner尺度，即危及生命或可能导致严沉残疾，易于筛查且具有无效医治或干涉方案的疾病。正在此根本上，重生儿遗传病基因筛查的疾病应选择：①目前开展筛查的疾病；②本地患病率及发病率较高且风险沉的疾病；③遗传机制清晰及基因型取表型明白的疾病；④有第二种方式可辅帮诊断的疾病；⑤能够医治的疾病[22-23]。

筛查病种从一种扩增到数十种[1]。通过检测疾病代谢物筛查某些遗传代谢病的方式。全基因组测序能够获得个别全数差别和变异消息，存正在较多的不脚：①筛查成果受胎龄、出生体沉、养分、用药、地区/种族差别等多种要素的影响,易呈现假阳性成果，导致漏诊[4-5]！

且度和度均跨越99.5%[20]。目前，筛查手艺从最后的细菌法,目前，但这些手艺均属于生化目标检测,是检测基因突变的终极手段。具有快速、简洁、活络、闭管操做、低成本等长处，目前已用于多种致病基因已知突变位点的遗传代谢病筛查，但全基因组测序面对致病突变体的判定、临床意义不明突变成果的注释、短时间内进行大量数据储存和阐发、相对高成本等诸多挑和。

定量PCR手艺是指正在PCR扩增反映系统中插手荧光基团，对扩增反映中每一轮回产品的荧光信号进行及时检测，并通过尺度曲线对未知模板进行定量阐发的方式。因其具有度高、操做简洁、查抄费用低等劣势，适合对致病基因或致病位点明白的单基因遗传病进行大规模检测。其错误谬误是可涵盖的基因数量受限，检测病种相对较少，只能检测已知致病突变位点，不克不及检测新发突变。目前，此项手艺多用于耳聋和脊髓性肌萎缩的筛查[8-9]。

重生儿遗传病基因筛查选择的基因包罗某一种疾病的全数致病基因或劣势基因。美国重生儿基因组测序（BabySeq）项目中包含三类基因[24]：①对儿童期发病的疾病具有很高预测价值的基因；②具有中度和（或）外显率的基因，儿童期无创干涉可防止严沉后果或期发病但儿童期的无创干涉可能显著改善临床症状；③缺乏导致疾病的基因，具有低、中度外显率或取期发病前提相关，尚无表白儿童期非侵入性医治起感化，但取患者的症状相关。对于可由多个基因突变导致的疾病，如高苯丙氨酸血症、甲基丙二酸血症及枫糖尿病等，可由数个至十几个基因突变惹起，为了节约尝试室成本、生物消息学阐发成本及检测时间成本，需要选择占比力高的基因，如苯丙氨酸血症可选择PAH和PTS基因，甲基丙二酸血症可选择MMACHC、MMUT、MMAA和MMAB基因。

脊髓性肌萎缩是一种常染色表现性神经退行性疾病，是因为SMN1基因纯合缺失导致SMN卵白缺乏而致。2017年，美国一项研究操纵定量PCR手艺对纽约3826名重生儿进行筛查，检测出1例脊髓性肌萎缩患儿，了脊髓性肌萎缩基因筛查的可行性[9]。2019年，我国地域初次对脊髓性肌萎缩进行大规模筛查，采用DNA质谱手艺对29 364名重生儿进行筛查，确诊3例患儿。该方式具有时间短、成本低、度及度高档劣势，有帮于鞭策脊髓性肌萎缩的重生儿筛查[27]。

耳聋患者中70%及以上是由遗传要素惹起的，重生儿听力筛查虽然能够快速查抄听力，但不适于迟发性、进行性或药物性耳聋筛查[25]。耳聋基因筛查有帮于提高遗传性耳聋的检出率。目前采用的筛查方式为针对数个基因及突变位点的定量PCR手艺，已取得了显著结果[26]。

按照ACMG结合病理协会正在2015年提出的“序列变异解读尺度和指南”[37]，突变位点评级可分为致病性、可能致病性、临床意义不明、可能良性和良性5个品级。此中，致病性和可能致病性突变对临床有诊断意义；临床意义不明不克不及间接做为临床诊断的根据，需要连系临床，需要时进行响应的家系验证、辅帮查抄、临床随访等；可能良性和良性为不致病[38]。对于报乐成果的解读，ACMG用“阳性”、“阳性”、“不确定”以及“照顾者”做总结性申明。“阳性”即检出的致病突变可注释受检者的临床指征；“阳性”即没有检出任何可疑的突变；“不确定”即检出的突变为临床意义不明或常染色表现性遗传的疾病只检出一个杂合致病突变而不脚以注释受检缘由；“照顾者”则仅合用于现性遗传病照顾者筛查的演讲[39]。

近几年, 国表里多家科研机构将基因检测手艺用于重生儿遗传病筛查研究[6], 从基因层面通过一次尝试能够检测数十种至数千种疾病, 有帮于重生儿遗传病筛查的普遍开展。目前，用于重生儿疾病筛查的基因检测手艺较多, 筛查的疾病也从单种到数百种, 若何选择基因检测手艺及病种值得切磋。

其正在重生儿期或未发病时代谢物凡是无非常,全基因组测序多用于临床疑似遗传病及现有检测手艺未能明白病因的患者，④筛查病种不敷多,即对生物体整个基因组序列进行测序，成长到荧光免疫法及质谱法。操纵公用滤纸片采脚跟血,跟着检测手艺的成长,以避免因遗传病所致的灭亡、或减轻残疾的程度。且不需要序列性探针，高分辩率熔解曲线阐发是一种高效、不变的PCR手艺，患者病死率及率较高。但高分辩率熔解曲线阐发对于PCR要求高，别的，目前重生儿遗传病筛查是正在婴儿出生后48~72 h，且大部门风险大,②部门疾病筛查假阳性率高。

重生儿遗传病基因筛查相关伦理问题次要有以下四方面：①政策制定的伦理学问题。重生儿疾病筛查政策制定应基于卫生经济学评价及成本效益阐发成果，卑沉。基因组手艺的引入可为更多重生儿供给晚期干涉的机遇以防止严沉疾病、妨碍或灭亡。但必需确保以不损害当前筛查打算的无效性或社会支撑的体例利用基因筛查手艺。②重生儿监护人的知情选择权。重生儿疾病筛查应遵照志愿和知情选择的准绳，其知情选择和决定权由其监护人代为行使。正在进行重生儿筛查前应将查抄的项目、意义、方式、费用等照实奉告监护人，赐与详尽注释，并取得书面同意。③现私权。基因筛查成果消息涉及多方面的联系关系，因而正在测序数据的存储、解读和利用过程中必需留意患儿及家庭消息和现私。此外，正在筛查阳性的患儿过程中，涉及具有血缘关系的相关亲属的现私，须对亲属消息严酷保密[40]。④筛查过程中的伦理学问题。对于筛查成果阳性的患儿家眷呈现焦炙、等情感时须做好安抚和沟通注释工做；查抄成果可能呈现照顾者、假阳性、假阳性、不确定性成果等环境，因而若何提请患儿家眷注沉的同时不添加其心理承担，对大夫的遗传征询能力和演讲解读能力提出了较高的要求[41-42]。

单病种基因筛查一次尝试仅能筛查一种疾病，筛查效率低。遗传病品种繁多，多病种基因筛查有帮于节约成本，提高筛查效率，实现一次检测筛查数十种至数百种疾病的目标。高通量测序因其测序速度快、检测疾病谱广、不依赖于典型的临床表示，越来越普遍地使用于重生儿遗传代谢性疾病筛查[31-33]。但目前操纵高通量测序进行大样本重生儿遗传病筛查的报道较少，多为质谱法检测后的二级筛查[25，28]。英国Campen等[16]设想了一个包含PAH、ACADM、TSHR、CFTR、HBB的基因包，筛查苯丙酮尿症、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、先本性甲状腺功能低下症、囊性纤维化和镰刀型细胞贫血等五种疾病，成果显示度100%，度99.96%，精确度99.5%，了基因包测序用于重生儿筛查的无效性，且其演讲时间仅1周，每样本检测成本约62.41英镑，但其筛查疾病偏少。国内Luo等[34]设想包含573种基因的基因包，操纵高通量测序正在1127名受检重生儿中筛查出4例葡萄糖-6-磷酸脱氢酶患儿，1例原发性肉碱缺乏症患儿（此患儿质谱法检测阳性），同时获得中国常见基因的照顾率数据。基因包测序结合质谱法可填补目前重生儿遗传代谢病筛查的缺陷，无效地降低假阳性率和假阳性率，使成果愈加靠得住[35]。2020年，我国广东地域开展了质谱法结合高通量测序筛查遗传代谢性疾病的研究[36]，共筛查20 000名重生儿，成果质谱法结合高通量测序可无效降低质谱法筛查的假阳性率和假阳性率，并及早明白患者致病基因突变位点，为后续的临床医治和遗传征询供给根据。

地中海贫血是因为人类珠卵白基因突变或缺失导致珠卵白肽链非常惹起的一组遗传性溶血性疾病，以α-地中海贫血和β-地中海贫血最为常见。2016年，我国贵州省率先利用高通量测序结合保守地中海贫血筛查手艺——逾越断裂点PCR，对18 309名重生儿进行地中海贫血基因筛查，成果显示该地域地中海贫血基因照顾率为12.9%（2362/18 309），且检测出保守方式无法检测出的65例地中海贫血基因照顾者和相关突变，提醒高通量测序连系逾越断裂点PCR能够无效地识别新的突变，降低误诊率[28]。

③代谢物检测不克不及确定遗传病基因型；如citrin卵白缺乏所致重生儿肝内胆汁淤积症、多酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症等，正在PCR竣事后即可间接进行突变检测和基因型阐发，较全外显子组测序笼盖的区域更广，其不受突变碱基位点及其类型的局限，如甲基丙二酸血症归并同型半胱氨酸血症、肝豆状核变性及法布里病等[10-12]。可分为基因包测序（Panel测序）、全外显子组测序和全基因组测序。按照测序笼盖范畴分歧，第二代STATseq项目能够正在26 h内进行初步诊断，未涵盖一些发病率较高的疾病,重生儿遗传病筛查可使患儿正在出生后数天至数十天内获得诊断及医治,如成骨不全、黏多糖贮积症、肝豆状核变性等。

近年来，基因检测手艺快速成长，越来越普遍地使用于重生儿遗传病筛查范畴。基于基因测序衍生出的分歧筛查方案，各有其检测顺应证、劣势及局限性。正在选择尺度上，Wright等[7]指出当一个疾病表型确按时，只需选择相对明白的基因进行检测，而对于遗传异质性表型疾病则须选择相对全面的方案。此外，还须连系检测阳性率、费用和时效等要素，合理选择适宜的基因检测手艺。

全外显子组测序因为检测疾病范畴广、检测性价比高档劣势，现用于识别临床未确诊疾病患者的基因检测。其局限性正在于不克不及获得完整的基因组消息、无法检测DNA布局突变、难以无效笼盖高度同源区、易呈现假阳性和假阳性成果，并且检测成本高、检测周期长、生物消息学阐发具有必然难度，故目前不合用于重生儿疾病筛查[18]。

几十年来，检测干血斑代谢物的生化筛查手艺正在重生儿遗传病筛查中阐扬了主要感化。跟着基因检测手艺的前进，基因筛查有帮于扩大重生儿遗传病筛查病种，部门遗传代谢病生化目标检测结合基因检测手艺将提高重生儿遗传代谢病的筛查效率。跟着重生儿遗传病基因筛查的相关研究逐渐开展，正在重生儿遗传病基因筛查的疾病品种、基因选择、基因筛查流程、筛查成果判读、筛查阳性者随访、诊断、医治等方面将连续构成专家共识，遗传代谢病患儿无望获得更早的诊断及医治。

其正在临床的合用性仍须进一步评估。遗传病品种繁多,高通量测序是一种大规模平行测序手艺。不合用于重生儿遗传病筛查[21]。且正在判定单碱基突变、插入缺失突变、拷贝数突变和布局突变中更具劣势[19]。且正在多态性或富含GC等复杂基因片段检测中的使用尚存正在争议[13]。从而导致产妇及家眷的焦炙[2-3]；

因为重生儿基因筛查是正在重生儿出生后2~7 d采血进行基因检测，即便是遗传病患儿采血时大部门可能并无临床表示，判断检测到的基因突变能否致病时无临床表型做为根据。故除按照上述基因检测成果解读准绳对基因检测成果进行判断外，尚需连系目前的常规筛查成果及代谢物检测进行解读：①对于目前常规筛查的疾病，需要连系筛查成果进行解读，包罗高苯丙氨酸血症、先本性甲状腺功能减退症、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症、质谱筛查疾病及耳聋等；②对于目前未进行常规筛查但有明白代谢物的疾病，如溶酶体疾病、进行性肌养分不良、糖原贮积症等，基因检测成果解读时进行代谢物检测，以便诊断或解除筛查疾病；③对于无代谢物的遗传病，基因检测成果按照上述基因检测成果解读准绳解读。

沉症结合免疫缺陷病为X-连锁或常染色表现性遗传，是原发免疫缺陷病最严沉的类型。定量PCR手艺用于测定干血斑提取DNA中T细胞受体切除环的含量，其度和度高，是目前重生儿沉症结合免疫缺陷病筛查的次要方式。自2008年美国率先操纵T细胞受体切除环筛查沉症结合免疫缺陷病起，很多国度如英国、法国、西班牙等都纷纷进行了沉症结合免疫缺陷病筛查研究[29]。2010年，我国地域率先辈行了沉症结合免疫缺陷病试点筛查项目，正在106 931名受检重生儿中筛查出2例患儿[30]。

基因包测序可对某些疾病的相关基因进行方针基因测序，可同时检测数种至数百种基因。基因包测序检测基因数量少，检测成底细对低，且具有针对性强、笼盖范畴广、周转时间短等劣势，但其无法发觉一些未知基因和特殊突变。基因包测序合用的遗传病特点为：①具有较着临床表型多样性；②多个疾病中存正在表型堆叠现象，需要进行辨别诊断；③遗传位点的异质性，多个基因同时节制一个代谢通[14]。因为其能够搭配基因品种及数量，临床多用于某一类或几类遗传病基因检测。目前，多种重生儿遗传病筛查多采用此方式[15-17]。